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Alcool Isopropilico al posto dell’Etanolo per conservazione campioni per analisi DNA



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MessaggioInviato: 29/05/2020, 23:12 
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Iscritto il: 17/02/2009, 0:05
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Località: Isola d'Elba - Arcipelago Toscano
Nome: Leonardo Forbicioni
Cari amici, sono qui a chiedere il vostro parere ed aiuto a rispondere ad una domanda che mi pongo da mesi.
Antefatto.

Ho a disposizione una discreta quantità di Alcool Isopropilico e stiamo avviando uno studio sugli Apoidei dell’Arcipelago Toscano.
Dovrò raccogliere e preparare numerosi esemplari ai quali provvederò a staccare una “zampetta” che sarà destinata all’analisi del DNA.

Il mio ragionamento:

Essendo L’Isopropanolo un alcool ed essendo utilizzato in alcune fasi dei protocolli di analisi del DNA, credo che non degradi in alcun modo la sua struttura, ma siccome nessuno lo ha mai utilizzato per conservare campioni al posto dell’Etanolo, non riesco a capire se posso utilizzarlo o meno!
L’uso dell’Alcool Etilico per conservare i campioni è dettato dal fatto che questo alcool ha un grande potere disidratante ed è proprio la perdita di acqua che impedisce i processi putrefattivi che sono una delle cause principali della degradazione del DNA.
L’isopropilico, per osservazione personale, sembra avere un potere disidratante molto superiore rispetto all’Etanolo ....ma il dubbio mi resta!
Non ho soldi al momento per acquistare grandi quantità di etanolo e quindi per me, l’utilizzo dell’Isopropilico sarebbe una salvezza!
Grazie in anticipo a chi saprà aiutarmi! :oops:

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MessaggioInviato: 03/09/2021, 13:46 
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Iscritto il: 22/05/2009, 21:00
Messaggi: 2636
Località: Pergine Valsugana (TN)
Nome: Andrea Carlin
:birra:
Qualcuno sa se per uso conservazione piccoli artropodi in alcool (solitamente a 70°) utilizzando dell'alcool per liquori o industria dolciaria a 95° (che si trova al supermarket) si possa usare in alternativa l'isopropilico? :? Indipendentemente dalle analisi del DNA; l'importante è che i campioni possano essere preparati poi a secco normalmente e non si perdano i colori.
Grazie mille. :lov2:
:hi:

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Andrea Carlin, Pergine Valsugana (TN) carlin.andrea(AT)gmail.com

Nota: tutti gli esemplari inseriti nelle discussioni aperte da me sono da ritenere "Andrea Carlin legit" se non diversamente specificato.


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MessaggioInviato: 16/12/2022, 15:51 
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Località: Casinalbo (MO)
Nome: Riccardo Poloni
Scusate, ho visto solo ora la discussione.
Sì, l'isopropanolo è usato per dei protocolli di estrazione: io per esempio Io lo uso per estrarre il DNA ad alto peso molecolare. Generalmente lo si usa per risospendere il DNA che va in fondo alle provette quando si estrae ma poi si sostituisce con l'etanolo che è più stabile e solubile. Per conservare i campioni meglio evitarlo. Il DNA viene degradato e per la differenza di prezzo che ci può essere non credo ne valga la pena, considerato anche il tempo e il denaro che si spende per il lavoro si campo.
Per conservare i campioni, anche se in caso di emergenza si può usare pure la grappa, la cosa migliore è l'alcol a 96 gradi, puro, non denaturato. Quello da laboratorio o quello che si vende al supermercato per fare i liquori. Altre sostanze si possono pure usare ma per una conservazione di base l'etanolo direi che sia sempre la soluzione migliore. Alcuni, per dire, quando si vuole avere una conservazione ottimale, usano l'RNA later per un breve periodo e poi congelano. Ma ripeto, io starei sull'etanolo per andare tranquilli. Costa relativamente poco e si trova facilmente...meglio di così!

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Riccardo Poloni
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MessaggioInviato: 16/12/2022, 15:52 
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Iscritto il: 21/05/2009, 14:59
Messaggi: 6960
Località: Casinalbo (MO)
Nome: Riccardo Poloni
Per conservare campioni si può usare pure l'alcol isopropilico ma onestamente non vedo perché quando l'alcol denaturato incolore non costa niente...

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Riccardo Poloni
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